大腸桿菌分離機(jī)是基因工程菌發(fā)酵液或細(xì)胞培養(yǎng)液中提取生化物質(zhì)的一個(gè)重要步驟,就是預(yù)處理和固液分離。其目的不僅在于分離大腸桿菌基因工程菌體和其他懸浮顆粒,還希望除去部分可溶性雜質(zhì)和改變發(fā)酵液的性質(zhì),以利于后續(xù)的從澄清的發(fā)酵液中采用物理、化學(xué)的方法提取代謝產(chǎn)物,或從大腸桿菌基因工程菌出發(fā)進(jìn)行細(xì)胞破碎、碎片的分離和提取胞內(nèi)產(chǎn)物。大腸桿菌基因工程菌發(fā)酵液中雜質(zhì)很多,其中有些雜質(zhì)不僅直接影響產(chǎn)品質(zhì)量和得率,同時(shí)對(duì)后續(xù)的提取和精制有很大影響,因此,在預(yù)處理時(shí),必須采用適當(dāng)方法使這些雜質(zhì)沉淀,在固液分離時(shí)除去,以利于后面的提取和精制過程能順利進(jìn)行。用于大腸桿菌基因工程菌發(fā)酵液固液分離的主要是離心分離,我們采用離心機(jī)高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力來實(shí)現(xiàn)發(fā)酵液的固液分離,具有分離速度快、分離效率高,液相澄清度好等優(yōu)點(diǎn);
大腸桿菌分離機(jī)的作用原理有離心過濾和離心沉降兩種。
?、匐x心過濾:懸浮液在離心力場(chǎng)下產(chǎn)生的離心壓力,作用在過濾介質(zhì)(濾網(wǎng)或?yàn)V布)上,使液體通過過濾介質(zhì)成為濾液;而固體顆粒被截留在過濾介質(zhì)表面,形成濾渣,從而實(shí)現(xiàn)液-固分離。過濾型轉(zhuǎn)鼓圓周壁上有孔,在內(nèi)壁襯以過濾介質(zhì)。
?、陔x心沉降:利用懸浮液(或乳濁液)密度不同的各組分在離心力場(chǎng)中迅速沉降分層的原理,實(shí)現(xiàn)液-固(或液-液)分離。沉降型轉(zhuǎn)鼓圓周壁無孔。典型的沉降型轉(zhuǎn)鼓。大腸桿菌分離機(jī)懸浮液(或乳濁液)加入轉(zhuǎn)鼓后,固體顆粒(或密度較大的液體)向轉(zhuǎn)鼓壁沉降,形成沉渣(或重分離液)。密度較小的液體向轉(zhuǎn)鼓中心方向聚集,流至溢流口排出,成為分離液(或輕分離液)。轉(zhuǎn)鼓均為間歇排渣,適用于含固體顆粒粒度較小、濃度較低的懸浮液或乳濁液分離;轉(zhuǎn)鼓用螺旋連續(xù)排渣,可分離固體顆粒濃度較高的懸浮液。在具有多層圓錐形碟片的轉(zhuǎn)鼓中,液體被碟片分成若干薄層,縮短了沉降分離的距離,使分離加快,改善了分離效果。